一、 基本介紹

雜交瘤技術(shù)是制備單克隆抗體的經(jīng)典方法，自1975年問世以來，一直是生命科學(xué)研究和生物醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)不可或缺的工具。該平臺通過將免疫細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，產(chǎn)生既能分泌特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)抗原的特異性、持續(xù)性的抗體生產(chǎn)。

二、 基本原理

雜交瘤電融合技術(shù)利用高壓脈沖電場，將免疫小鼠脾細(xì)胞（B細(xì)胞）與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行融合，形成雜交瘤細(xì)胞。B細(xì)胞具有分泌特異性抗體的能力，而骨髓瘤細(xì)胞具有無限增殖的特性。通過電融合，將兩種細(xì)胞的優(yōu)勢結(jié)合，獲得既能分泌特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細(xì)胞，從而實(shí)現(xiàn)對目標(biāo)抗原的特異性、持續(xù)性的抗體生產(chǎn)。

三、 核心流程

1. 免疫小鼠： 使用目標(biāo)抗原免疫小鼠，刺激小鼠脾臟產(chǎn)生特異性B細(xì)胞。
2. 制備細(xì)胞懸液： 分離免疫小鼠脾細(xì)胞，與骨髓瘤細(xì)胞按一定比例混合，制備細(xì)胞懸液。
3. 電融合： 將細(xì)胞懸液加入電融合儀中，施加高壓脈沖電場，促使細(xì)胞膜發(fā)生可逆性穿孔，相鄰細(xì)胞膜融合，形成雜交瘤細(xì)胞。
4. 篩選與克隆： 利用HAT培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞，并通過有限稀釋法進(jìn)行單克隆化，獲得穩(wěn)定分泌目標(biāo)抗體的雜交瘤細(xì)胞株。
5. 抗體生產(chǎn)與純化： 擴(kuò)大培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞，收集上清液，采用蛋白A/G親和層析等方法純化抗體。

四、 技術(shù)優(yōu)勢

1.我們搭建了多種蛋白表達(dá)系統(tǒng)平臺，尤其是膜蛋白平臺，能夠?yàn)镚PCR等膜蛋白的研發(fā)提供有力支持。實(shí)現(xiàn)天然構(gòu)象和高度穩(wěn)定性，有效提高抗原呈遞效率。

2.結(jié)合流式細(xì)胞術(shù)和高通量篩選技術(shù)，能夠快速篩選具有高親和力和特異性的單克隆抗體，顯著縮短篩選周期。

3.適用于GPCR、離子通道、轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白和其他多種膜蛋白靶點(diǎn)，具備廣泛的應(yīng)用潛力和市場價值。

4.通過雜交瘤技術(shù)結(jié)合免疫原優(yōu)化，有效提升抗體與膜蛋白的結(jié)合強(qiáng)度和特異性，確保高效識別和結(jié)合。

5.采用優(yōu)化的細(xì)胞系和培養(yǎng)體系，保證抗體的高效表達(dá)和批量穩(wěn)定制備，確保工藝可重復(fù)性和產(chǎn)品一致性。

1. GPRC5D 抗體的篩選
2. DDR1抗體的篩選

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